САНКТ-ПЕТЕРБУРГ

Мы приглашаем вас насладиться красками природы, посетив галерею фотографий.

Реклама

комплексные поставки лакокрасочных материалов

лаки, краски, эмали, грунтовки, шпатлевки

Исключения из правила «никогда не фильтровать» имеют место, когда подвиж­ная фаза содержит модификаторы (особенно соли), добавленные в растворитель. В этом случае растворитель, содержащий соли, следует готовить и фильтровать не­зависимо, а затем смешивать с другими высокочистыми растворителями. Напри­мер, так готовят смесь метанол/вода (0,05 М ацетатный буфер с рН 4) с объемным отношением 50:50; водный ацетатный буфер готовят из ледяной уксусной кислоты и ацетата натрия, фильтруют, а затем добавляют к равному объему метанола.

1.17. Производители и протоколы контроля

Сборник Американского химического общества (Reagent Chemicals, 9th edition [41]) является основной публикацией по процедурам контроля растворителей для ВЭЖХ. В нем описаны две процедуры, одна — для проверки воды на пригодность для контроля растворителей, используемых в ВЭЖХ. Собственно метод контроля представляет собой градиентную хроматографию на колонке С₁₈ и применим то­лько для градиентов вода/ацетонитрил и вода/метанол. Кривые элюирования из­меряют при 254 нм и величина оптической плотности в максимуме пика (не пла­то) не превышает 0,005. Заметим, что выбор длины волны 254 нм означает, что метод направлен на оценку содержания фенил- и карбонилсодержащих примесей.

Отдельные производители разрабатывают свои сборники протоколов конт­роля, и вам следует связаться с ними, если у вас есть вопросы.

Глава 2

Методы оптимизации

В литературе описаны методы оптимизации хроматографических экспериментов, позволяющие сберечь много времени. Часто можно найти описание разделения соединений, похожих по структуре на те, которые требуется разделить. К сожале­нию, не всегда описаны именно такие способы разделения, которые нужны, и, следовательно, для получения желаемых результатов требуется некоторая пере­работка метода.

Если аналитик не столь удачлив и не находит подходящего метода в литера­туре, тогда может потребоваться разработка совершенно нового метода. В лю­бом случае оптимизация метода необходима. Заметим, что содержание термина «оптимизация» определяет аналитик. Чтобы начать оптимизацию, нужно уста­новить критерии [т. е. минимальный (величина должна быть >Х), максимальный (величина должна быть <У) или ограниченный (между X и У)] для любого или всех параметров: форма пика, высота пика, разрешение пиков, время цикла и об­щее время анализа (а следовательно, производительность). Что касается послед­него критерия, следует помнить о том, что при градиентном разделении время возврата к равновесию должно считаться частью времени анализа, поскольку последующий ввод пробы нельзя проводить до тех пор, пока система не придет в равновесие с начальным растворителем.